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            細胞凋亡陽性對照試劑盒

            產品簡介

            細胞凋亡陽性對照試劑盒公司正在出售的產品:β半乳糖1樣蛋白3抗體Mcl-1/FITC 熒光素標記髓樣白血病-1抗體IgG
            糖皮質激素誘導轉錄蛋白1抗體Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163)/FITC 熒光素標記磷化髓樣白血病-1抗體IgG
            16373-93-62′-脫氧腺(0.25%)乙二胺四乙混合液
            1326-12-1硫磺S乙二胺四乙(EDTA)細胞脫離溶液
            鼻疽假單胞菌P

            更新時間:2022-06-20
            訪問次數:1038

            產品分類

            PRODUCT CLASSIFICATION

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            公司產品僅供科研使用,下列是產品屬性:

            產品名稱

            英文名稱

            規格

            貨號

            細胞凋亡陽性對照試劑盒

            Apoptosis Inducers Kit

            200次

            LZ-01X6324

             

            圖片1.png 

            商品介紹:

            本試劑盒含有兩種不同的細胞凋亡誘導試劑,試劑A和試劑B。細胞凋亡誘導試劑A(Apopida)和試劑B(Apobid)分別可以誘導Hela、HEK293、CHO、COS等常見細胞的細胞凋亡。

            由于細胞凋亡的誘導具有細胞特異性,細胞凋亡的機制也具有一定的細胞特異性,盡管細胞凋亡誘導試劑A和試劑B可以誘導常見的一些細胞的細胞凋亡,但是我們無法保證這兩種試劑可以誘導任何一種細胞發生凋亡。細胞凋亡誘導試劑A和試劑B相互補充,可以誘導更多種類的細胞產生凋亡。本試劑盒至少可用于檢測200個樣品。

            試劑盒組份:

            細胞凋亡誘導試劑A——————200μl

            細胞凋亡誘導試劑B——————200μl

            注意事項:對于不同的細胞,需要摸索細胞凋亡誘導試劑的不同濃度和誘導時間。

            儲存條件:-20℃,有效期一年。
            注意事項:

            ①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

            ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

            ③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

            ④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

            ⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

            ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

            ⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

            ⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

            ⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

            實驗步驟:

            (1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

            (2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻

            (3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次

            (4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

            (5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

            (6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)

            (7)10,000rpm,4℃離心20min

            (8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀

            (9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

            (10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

            (11)12,000rpm,4℃離心20 min

            (12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

            (13)加200ul的DEPC處理水溶解

            (14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量

            (在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)

            操作程序:

            注意:最重要的是及時固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC處理,以抑制RNA酶對mRNA的分解作用。此外,過度固定對原位雜交有明顯的不利影響。

            1.玻片的處理:一般采用多聚賴氨酸或APES。切片厚度10-20μm。

            2.細胞在多聚賴氨酸處理的蓋玻片上進行培養,條件為37℃和5%的CO2,所用培養基為Dulbecco基礎培養基。細胞長好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分鐘×3次。

            3.培養細胞和冰凍切片均可用下述方法固定:固定液為4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室溫固定 20--30分鐘。蒸餾水充分洗滌,干燥后-20℃冰凍可保存2周以上。

            4.30%H2O2 1份+純甲醇50份混合,室溫處理30分鐘。蒸餾水洗滌3次。

            5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%檸檬酸新鮮稀釋1ml 3% 檸檬酸加2滴濃縮型,混勻),37℃或室溫消化5—120秒鐘。有時也可以不消化。原位雜交用 PBS洗3次×5分鐘。蒸餾水洗1次。

            6.后固定:消化后才需要。固定液為1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室溫固定 10分鐘。蒸餾水洗滌3次。

            7.預雜交:濕盒的準備——干的雜交盒底部加20%甘油20ml以保持濕度。按每張切片20μι加預雜交液。恒溫箱38-42℃2—4小時。吸取多余液體,不洗。

            8.雜交——按每張切片20μι雜交液,加在切片上。將原位雜交專用蓋玻片的保護膜揭開后,蓋在切片上。恒溫箱38-42℃雜交過夜(根據雜交情況可以調節)。

            9.雜交后洗滌:揭掉蓋玻片,37℃左右水溫的2×SSC洗滌5分鐘×2次;37℃0.5×SSC洗滌15分鐘×1次; 37℃0.2×SSC洗滌15分鐘×1次(如果有非特異性染色,重復0.2×SSC洗滌15分鐘×1-2次)。

            10.滴加封閉液:37℃30分鐘。甩去多余液體,不洗

            11.滴加化鼠抗*:37℃ 60分鐘或室溫120分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。

            12.滴加SABC:37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×3次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。

            13.滴加化過氧化物酶:37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。

            14.DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒—1ml蒸餾水加顯色劑A,B,C各一滴,混勻,加至標本上。一般顯色20-30分鐘。若無背景出現則可繼續顯色。也可自配DAB顯色劑后顯色。充分水洗。

            15.必要時蘇木素復染,充分水洗。

            16.酒精脫水,二甲苯透明,封片。

            腫瘤壞死因子受體相關因子6(TRAF6)英文名稱:TRAF6 ELISA Kit磷化Ack1抗體包裝5g

            腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)英文名稱:TNFRSF11A/RANK ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體包裝1g

            腫瘤壞死因子配體相關分子1(TL1)英文名稱:TL1 ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激β1抗體包裝5g

            腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)英文名稱:TNFsR-Ⅱ ELISA Kit磷化間變型淋巴瘤激抗體包裝25g

            腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)英文名稱:TNFsR-Ⅰ ELISA Kit磷化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體包裝5g

            腫瘤壞死因子β(TNF-β)英文名稱:TNF-β ELISA Kit磷化三磷腺檸檬裂解抗體包裝100ml

            腫瘤壞死因子α(TNF-α)英文名稱:TNF-α ELISA Kit磷化ATR抗體包裝25ml

            腫瘤壞死因子α(TNFα)英文名稱:TNFα ELISA Kit核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體包裝500ml

            腫瘤蛋白p53(TP53)英文名稱:TP53 ELISA Kit天門冬酰連接糖基化11抗體包裝1g

            腫瘤標志物(CA724)英文名稱:CA724 ELISA Kit衰老相關蛋白ASF1A抗體包裝1ml

            中性粒細胞明膠相關脂質運載蛋白(NGAL)英文名稱:NGAL ELISA Kit基糖苷類磷結構域蛋白抗體包裝100g

            中性粒細胞彈性蛋白(NE)英文名稱:NE ELISA Kit唾液糖蛋白受體1抗體包裝25g

            脂氧A4(LXA4)英文名稱:LXA4 ELISA Kit芳香基硫酯F抗體包裝5g

            脂聯(ADP)英文名稱:ADP ELISA KitA激錨定蛋白5抗體包裝1mg

            脂聯(Acrp30)英文名稱:Acrp30 ELISA Kit小腦脊髓共濟失調蛋白3抗體包裝100g

            γ2肌動蛋白抗體甘脫氫(GLDC)Infigratinib (BGJ-398; NVP-BGJ398) 是 FGFR 家族的有效抑制劑,抑制 FGFR1,FGFR2,FGFR3 和 FGFR4
            細胞凋亡陽性對照試劑盒棕褐小單孢 2,5-二氨基-4,6-二羥基嘧啶鹽酸鹽1-磷酸鞘氨Elisa

            猴頭 L-(+)-環己基甘2,3-二磷酸甘油酸Elisa

            Frigoribacterium 酸倍米松2,5寡腺苷酸合成Elisa

            大腸桿 Fmoc-D-4-苯2,5寡腺苷酸合成2Elisa

            枯草芽胞桿 (合成)20-HETEElisa

            菊異莖點霉 鹽酸二氟沙星25羥基維生DElisa

            蒼黃鏈霉 4-基α-L-吡喃阿伯糖苷25羥基維生D3Elisa

            假單孢 4-羥基苯乙2-硫代噻唑烷-4-羧酸Elisa

            大腸埃希氏 3,5-二氟溴芐3-硝基酪Elisa

            三葉草根瘤 雙酮-D-甘露糖3型1-磷酸鞘氨受體Elisa

            委內瑞鏈霉 異龍腦4-羥基壬烯Elisa

            紅色紅曲  葉綠5α還原Elisa

            冬蟲夏草 17α-乙炔基雌二5-甲基四氫Elisa

            莫哈韋芽孢桿 針葉櫻桃提取物5羥基乙酸Elisa

            海洋桿 羥基酪5羥色Elisa


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